நம்மைச் சுற்றிப் பல அறியப்படாத நாயகர்கள் உள்ளனர்; அவர்கள் பார்ப்பதற்குச் சாதாரணமானவர்களாகத் தோன்றினாலும், உண்மையில் நமக்கு மௌனமாகப் பெரும் பங்களிப்பைச் செய்கிறார்கள். மூலக்கூறு நோயறிதல் துறையில் புரோட்டினேஸ் கே ஒரு "அறியப்படாத நாயகன்" ஆகும். இருப்பினும், இத்துறையில் உள்ள "பெரிய மற்றும் சக்திவாய்ந்த" நிறுவனங்களுடன் ஒப்பிடும்போது, புரோட்டினேஸ் கே மிகவும் முக்கியத்துவம் குறைந்ததாக இருப்பதால், நாம் அதன் முக்கியத்துவத்தை நீண்ட காலமாகப் புறக்கணித்துவிட்டோம். புதிய கொரோனா வைரஸ் தொற்றுநோய் பரவியதால், புரோட்டினேஸ் கே-க்கான தேவை பன்மடங்கு அதிகரித்துள்ளது. உள்நாட்டிலும் வெளிநாட்டிலும் அதன் விநியோகம், நுகர்வை விட மிகவும் பின்தங்கியுள்ளது. அப்போதுதான் புரோட்டினேஸ் கே எவ்வளவு முக்கியமானது என்பதை அனைவரும் திடீரென உணர்ந்தனர்.
புரோட்டினேஸ் K-யின் பயன்பாடு என்ன?
புரோட்டினேஸ் K என்பது புரோட்டியோலிடிக் நொதி செயல்பாட்டைக் கொண்ட ஒரு செரின் புரோட்டியேஸ் ஆகும். இது பரந்த அளவிலான சூழல்களில் (pH (4-12.5), அதிக உப்பு கொண்ட தாங்கல் கரைசல், 70°C உயர் வெப்பநிலை போன்றவை) தனது செயல்பாட்டைத் தக்க வைத்துக் கொள்ளும் திறன் கொண்டது. மேலும், புரோட்டினேஸ் K-யின் செயல்பாடு SDS, யூரியா, EDTA, குவானிடின் ஹைட்ரோகுளோரைடு, குவானிடின் ஐசோதியோசயனேட் போன்றவற்றால் தடுக்கப்படுவதில்லை. அத்துடன், ஒரு குறிப்பிட்ட அளவு டிடர்ஜென்ட் புரோட்டினேஸ் K-யின் செயல்பாட்டை அதிகரிக்கவும் செய்கிறது. மருத்துவ சிகிச்சை (வைரஸ் மற்றும் நுண்ணுயிர் கிருமி நீக்கம்), உணவு (இறைச்சியை மென்மையாக்குதல்), தோல் (முடியை மென்மையாக்குதல்), ஒயின் தயாரிப்பு (ஆல்கஹாலைத் தெளிவுபடுத்துதல்), அமினோ அமிலத் தயாரிப்பு (சிதைந்த இறகுகள்), நியூக்ளிக் அமிலப் பிரித்தெடுத்தல், இன் சிட்டு ஹைப்ரிடைசேஷன் போன்றவற்றில் புரோட்டினேஸ் K-க்கு பயன்பாடுகள் உள்ளன. இவற்றில் மிகவும் பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் பயன்பாடு நியூக்ளிக் அமிலப் பிரித்தெடுத்தல் ஆகும்.
புரோட்டினேஸ் K, மாதிரியில் உள்ள நியூக்ளிக் அமிலங்களுடன் இறுக்கமாகப் பிணைக்கப்பட்ட ஹிஸ்டோன்கள் உட்பட அனைத்து வகையான புரதங்களையும் நொதிச்சிதைவு செய்யக்கூடியது. இதன் மூலம், நியூக்ளிக் அமிலங்கள் மாதிரியிலிருந்து விடுவிக்கப்பட்டு, பிரித்தெடுக்கப்பட்ட கரைசலில் சேர்க்கப்படுகின்றன. இது பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் சுத்திகரிப்பின் அடுத்த கட்டத்தை எளிதாக்குகிறது. வைரஸ் நியூக்ளிக் அமிலத்தைக் கண்டறிவதில், வைரஸ் மாதிரி கரைசலில் உள்ள முக்கியமான கூறுகளில் புரோட்டினேஸ் K ஒன்றாகும். புரோட்டினேஸ் K, வைரஸின் மேலுறைப் புரதத்தை உடைத்து செயலிழக்கச் செய்யக்கூடியது. இது கொண்டு செல்லுதல் மற்றும் கண்டறிதல் கட்டங்களில் மிகவும் பாதுகாப்பானது. மேலும், புரோட்டினேஸ் K, RNase-ஐ சிதைப்பதன் மூலம் வைரஸ் RNA சிதைவடைவதைத் தடுத்து, நியூக்ளிக் அமிலத்தைக் கண்டறிவதை எளிதாக்குகிறது.
புரோட்டினேஸ் K-யின் ஒரே இரவில் கிடைத்த புகழ்
அறிவியல் ஆராய்ச்சித் துறையாக இருந்தாலும் சரி, IVD துறையாக இருந்தாலும் சரி, நியூக்ளிக் அமிலப் பிரித்தெடுத்தல் என்பது மிகவும் அடிப்படையான ஒரு சோதனையாகும். அதனால், புரோட்டினேஸ் K எப்போதுமே மிக முக்கியமான ஒன்றாக இருந்து வருகிறது. இருப்பினும், கடந்த காலத்தில், புரோட்டினேஸ் K-ன் பங்கைப் பற்றி அறிந்திருப்பதை விட, அது மிகவும் குறைவாகவே அறியப்பட்டிருந்தது. இதற்கு ஒரு முக்கியக் காரணம், புரோட்டினேஸ் K-ன் அளிப்பு மற்றும் தேவை உறவு மிகவும் நிலையானதாக இருந்ததுதான். புரோட்டினேஸ் K-ன் அளிப்பு ஒரு பிரச்சனையாக இருக்கும் என்று மிகச் சிலரே நினைத்திருப்பார்கள்.
புதிய கொரோனா வைரஸ் தொற்றுநோய் பரவியதால், நியூக்ளிக் அமிலப் பரிசோதனைகளுக்கான தேவை பெருமளவில் அதிகரித்துள்ளது. 2020 ஜூன் மாத இறுதியில், சீனா கிட்டத்தட்ட 9 கோடி புதிய கொரோனா வைரஸ் பரிசோதனைகளை நிறைவு செய்துள்ளது, மேலும் இந்த எண்ணிக்கை உலக அளவில் இன்னும் கவலையளிப்பதாக உள்ளது. நியூக்ளிக் அமிலப் பிரித்தெடுப்பு சோதனைகளில், புரோட்டினேஸ் K-யின் செயல்பாட்டுச் செறிவு சுமார் 50-200 μg/mL ஆகும். பொதுவாக, ஒரு நியூக்ளிக் அமில மாதிரியைப் பிரித்தெடுக்க சுமார் 100 μg புரோட்டினேஸ் K தேவைப்படுகிறது. நடைமுறைப் பயன்பாட்டில், நியூக்ளிக் அமிலப் பிரித்தெடுப்பின் செயல்திறனை அதிகரிப்பதற்காக, புரோட்டினேஸ் K பெரும்பாலும் அதிக அளவில் பயன்படுத்தப்படும். புதிய கொரோனா வைரஸின் நியூக்ளிக் அமிலக் கண்டறிதல், புரோட்டினேஸ் K-க்கான பெரும் தேவையை ஏற்படுத்தியுள்ளது. புரோட்டினேஸ் K-யின் அசல் வழங்கல் மற்றும் தேவைச் சமநிலை விரைவாக உடைந்தது, மேலும் புரோட்டினேஸ் K ஒரே இரவில் ஒரு முக்கியமான தொற்றுநோய் தடுப்புப் பொருளாக மாறியது.
புரோட்டினேஸ் K உற்பத்தியில் உள்ள சிக்கல்கள்
தொற்றுநோயின் வளர்ச்சியால் புரோட்டினேஸ் K-யின் முக்கியத்துவம் மக்களால் உணரப்பட்டபோதிலும், புரோட்டினேஸ் K-யின் பயன்பாடு மிகவும் குறைவாக இருப்பதால், சில உள்நாட்டு நிறுவனங்களே அதன் உற்பத்தியில் ஈடுபட்டுள்ளன என்பது வருத்தமளிக்கிறது. மக்கள் புரோட்டினேஸ் K உற்பத்தியை நிறுவ விரும்பியபோது, உற்பத்திச் செயல்பாட்டின் போது, புரோட்டினேஸ் K ஒரு மிகவும் சிறப்பு வாய்ந்த புரதம் என்பது கண்டறியப்பட்டது. குறுகிய காலத்தில் புரோட்டினேஸ் K-யின் உற்பத்தித் திறனை விரிவுபடுத்துவது மிகவும் சவாலானது.
புரோட்டினேஸ் K-ஐ பெருமளவில் உற்பத்தி செய்வதில் பின்வரும் சிரமங்கள் உள்ளன.
1. குறைந்த வெளிப்பாடு
புரோட்டினேஸ் K ஆனது பெரும்பாலான புரதங்களை குறிப்பிட்ட தன்மையின்றி சிதைத்து, வெளிப்படுத்தப்படும் ஓம்புயிரி செல்லுக்கு கடுமையான நச்சுத்தன்மையை ஏற்படுத்தக்கூடும். எனவே, புரோட்டினேஸ் K-இன் வெளிப்பாட்டு அளவு பொதுவாக மிகக் குறைவாகவே இருக்கும். புரோட்டினேஸ் K-ஐ அதிக அளவில் வெளிப்படுத்தும் வெளிப்பாட்டு அமைப்புகளையும் திரிபுகளையும் திரையிடுவதற்கு பொதுவாக ஒரு நீண்ட சுழற்சி தேவைப்படுகிறது.
2. நிறமிகள் மற்றும் நியூக்ளிக் அமிலங்களின் எச்சங்கள்
பெரிய அளவிலான நொதித்தல் செயல்முறையானது, அதிக அளவிலான நிறமி மற்றும் மூலக்கூறு நியூக்ளிக் அமில எச்சங்களை அறிமுகப்படுத்துகிறது. ஒரு எளிய சுத்திகரிப்பு செயல்முறையின் மூலம் இந்த அசுத்தங்களை அகற்றுவது கடினம், மேலும் சிக்கலான சுத்திகரிப்பு முறையானது செலவை அதிகரித்து, மீட்கும் விகிதத்தைக் குறைக்கிறது.
3. நிலையற்ற தன்மை
புரோட்டினேஸ் K போதுமான அளவு நிலைத்தன்மை அற்றது, அது தன்னைத்தானே நொதிச்சிதைவுக்கு உள்ளாக்கிக் கொள்ளும், மேலும் ஒரு பாதுகாப்புப் பொருள் இல்லாமல் அதனை 37°C வெப்பநிலையில் நீண்ட காலத்திற்கு நிலையாகச் சேமித்து வைப்பது கடினம்.
4. எளிதில் வீழ்படிவாகும்
புரோட்டினேஸ் K-யின் உறைவிக்கப்பட்ட தூளைத் தயாரிக்கும்போது, அத்தூளில் புரோட்டினேஸ் K-யின் திடப்பொருளின் அளவு அதிகமாக இருப்பதை உறுதி செய்வதற்காக, அதிக செறிவில் ஒரு உறைவிக்கப்பட்ட பாதுகாப்புப் பொருளைச் சேர்க்க வேண்டியது அவசியம். ஆனால், புரோட்டினேஸ் K-யின் செறிவு 20mg/mL மற்றும் அதற்கு மேல் அடையும்போது, அது எளிதில் திரண்டு வீழ்படிவை உருவாக்குகிறது. இது, அதிக திடப்பொருள் உள்ளடக்கம் கொண்ட புரோட்டினேஸ் K-யை உறைவித்து உலர்த்துவதில் பெரும் சிரமங்களை ஏற்படுத்துகிறது.
5. பெரிய முதலீடு
புரோட்டினேஸ் K வலுவான புரோட்டியேஸ் செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது மற்றும் ஆய்வகத்தில் மற்ற புரோட்டியேஸ்களை நீராற்பகுக்க வல்லது. எனவே, புரோட்டினேஸ் K-இன் ஆராய்ச்சி, மேம்பாடு மற்றும் உற்பத்திக்கு சிறப்பு உற்பத்திப் பகுதிகள், உபகரணங்கள் மற்றும் பணியாளர்கள் தேவைப்படுகின்றன.
XD பயோகெம்-இன் புரோட்டினேஸ் K கரைசல்
XD பயோகெம் ஒரு முதிர்ந்த புரத வெளிப்பாடு மற்றும் சுத்திகரிப்பு தளத்தைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் மறுசேர்க்கை புரதங்களின் வெளிப்பாடு மற்றும் சுத்திகரிப்பு மற்றும் உற்பத்தி செயல்முறைகளை மேம்படுத்துவதில் சிறந்த அனுபவத்தைக் கொண்டுள்ளது. ஒரு ஆராய்ச்சி மற்றும் மேம்பாட்டுக் குழுவை விரைவாக உருவாக்கியதன் மூலம், புரோட்டினேஸ் K-யின் பெரிய அளவிலான உற்பத்தி செயல்முறை வெற்றிகரமாகக் கையாளப்பட்டுள்ளது. உறை-உலர்த்தப்பட்ட தூளின் மாதாந்திர உற்பத்தி 30 கிலோகிராமுக்கும் அதிகமாகும். இந்தத் தயாரிப்பு நிலையான செயல்திறன், அதிக நொதி சார்ந்த செயல்பாடு ஆகியவற்றைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் இதில் புரத சைட்டோக்ரோம் மற்றும் நியூக்ளிக் அமில எச்சங்கள் இல்லை. XD பயோகெம்மைத் தொடர்பு கொள்ள வரவேற்கிறோம். ஒரு சோதனைத் தொகுப்பைப் பெறுங்கள் (மின்னஞ்சல்:sales@xdbiochem.comதொலைபேசி: +86 513 81163739).
XD பயோகெம்மின் தொழில்நுட்பத் தீர்வுகளில் அடங்குபவை:
பல நகல் பிளாஸ்மிட் ஒருங்கிணைப்பைப் பயன்படுத்தி, 8g/L வெளிப்பாட்டு நிலை கொண்ட உயர் வெளிப்பாட்டுத் திரிபுகள் தேர்ந்தெடுக்கப்படுகின்றன, இது புரோட்டினேஸ் K-இன் குறைந்த வெளிப்பாட்டு நிலை என்ற சிக்கலைச் சமாளிக்கிறது.
பல படிநிலைகளைக் கொண்ட சுத்திகரிப்பு செயல்முறையை நிறுவியதன் மூலம், புரோட்டினேஸ் K-யின் ஹோஸ்ட் சைட்டோக்ரோம் மற்றும் நியூக்ளிக் அமில எச்சங்கள் நிர்ணயிக்கப்பட்ட மதிப்பிற்குக் கீழே வெற்றிகரமாக அகற்றப்பட்டன.
பாதுகாப்பு இடையகக் கலவைகளின் அதிவேகச் சோதனையின் மூலம், 37°C வெப்பநிலையில் புரோட்டினேஸ் K-ஐ நிலையாகச் சேமிக்கக்கூடிய ஒரு இடையகக் கரைசல் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டது.
சல்லடைத் தாங்கிகள், புரோட்டினேஸ் K அதிக செறிவுகளில் எளிதில் திரண்டு வீழ்படிவாகும் சிக்கலைச் சமாளிப்பதோடு, புரோட்டினேஸ் K-இன் அதிக திட உள்ளடக்க உறை-உலர்த்தலுக்கு அடித்தளத்தையும் அமைக்கிறது.
XD பயோகெம் புரோட்டினேஸ் K மாதிரி
XD பயோகெம் புரோட்டினேஸ் K நிலைத்தன்மை சோதனை: அறை வெப்பநிலையில் 80 நாட்களுக்குப் பிறகு செயல்பாட்டில் குறிப்பிடத்தக்க மாற்றம் எதுவும் இருக்காது.
XD பயோகெம் புரோட்டினேஸ் K நிலைத்தன்மை சோதனை: அறை வெப்பநிலையில் 80 நாட்களுக்குப் பிறகு செயல்பாட்டில் குறிப்பிடத்தக்க மாற்றம் எதுவும் இருக்காது.
XD பயோகெம் புரோட்டினேஸ் K மற்றும் போட்டியிடும் தயாரிப்புகளின் நியூக்ளிக் அமில பிரித்தெடுப்பு விளைவின் ஒப்பீடு. நியூக்ளிக் அமில பிரித்தெடுப்பு செயல்பாட்டில், XD பயோகெம் மற்றும் போட்டியிடும் புரோட்டினேஸ் K ஆகியவை முறையே பயன்படுத்தப்படுகின்றன. XD பயோகெம் புரோட்டினேஸ் K-இன் பிரித்தெடுப்புத் திறன் அதிகமாகவும், இலக்கு மரபணுவின் Ct மதிப்பு குறைவாகவும் உள்ளது.
பதிவிட்ட நேரம்: டிசம்பர் 31, 2021